醫學會議中心

我的位置:醫學教育網> 醫學會議中心> 醫學專家視點

利用靶向性胞嘧啶脫氨酶進行基因編輯

2018-03-02 09:33

全免费观看三级單核苷酸的多樣性是遺傳多樣性的主要來源,是人類個體差異的重要遺傳學基礎,同時也是分子進化的動力和很多疾病的直接誘因。然而,在哺乳動物中,仍然缺乏有效誘導單核苷酸的突變的工具,無法通過實驗高效和高通量的地研究單核苷酸突變的功能。現有的大部分實驗技術只能擾亂基因的功能或者表達,造成基因功能缺失,對誘導新功能的獲得無能為力。而利用靶向性胞嘧啶脫氨酶介導的堿基編輯(Targeted AID-mediated mutagenesis ,TAM)技術,可以在sgRNA靶向的基因組DNA上,將胞嘧啶和鳥嘌呤隨機地向其它三個堿基轉變,因而產生海量的突變體,結合遺傳篩選,從而分析單核苷酸突變的功能或誘導蛋白質的體內進化。同時在一種多肽抑制劑(UGI)的輔助下,dCas9-AID可以誘導特定的胞嘧啶向胸腺嘧啶轉變,實現單堿基的精確編輯,為治療單核苷酸突變誘導的遺傳病提供方案。利用這項技術,已經在慢性骨髓瘤細胞中,成功篩選出已報道的以及新的imatinib耐藥性位點。因此,作為高效的哺乳動物DNA堿基編輯新技術,TAM可以廣泛應用于蛋白質工程,分子遺傳學研究和基因治療等領域。